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仅支持细胞综合征患者睾丸活检中无精子的减数分裂前、减数分裂和减数分裂后细胞的鉴定

2023-09-11 08:09:43 点击数:

仅支持细胞综合征 (SCOS) 影响约 26.3⁻57.8% 的无精子症男性,他们的生精小管仅含有支持细胞。

最近有报道称,非梗阻性无精子症(NOA)患者的睾丸活检中含有生殖细胞,利用睾丸精子提取技术,20%的SCOS患者的小管中可以发现精子。由于睾丸活检中没有精子的患者无法接受治疗来帮助他们生下亲生孩子,因此从睾丸中分离出的精原干细胞(SSC)的体外成熟是未来可能治疗不孕症的一种新方法。

最近,使用不同的培养系统证明了人类和小鼠 SSC 增殖和分化的诱导。我们的小组报告了使用 3D 琼脂和甲基纤维素 (MCS) 培养系统诱导小鼠、恒河猴和患有癌症的青春期前男孩的精原细胞增殖和分化至减数分裂和减数分裂后阶段。该研究的目的是确定 SCOS 患者不含精子的活检组织中存在的生精细胞类型,并检查使用 3D MCS 在体外从这些活检组织中分离的精原细胞诱导精子发生的可能性。

我们使用了来自 SCOS 患者的 9 份不含精子的活检组织,并通过 PCR 和特异性免疫荧光染色分析评估了生精标志物的存在。在含有不同生长因子的 StemPro 富集培养基存在下,在 MCS 中培养分离的睾丸细胞,并在显微镜下检查集落/簇的发育。我们在 MCS 中培养 3⁻7 周之前和之后检查了精子发生不同阶段的细胞的存在情况。我们的结果表明,这些活检显示存在减数分裂前标记(每个活检有 2 到 7 个标记)、减数分裂标记(9 个活检中检测到 cAMP 反应元件调节剂 1 (CREM-1)),在 5 个活检中检测到乳酸脱氢酶 (LDH)。 5 个,BOULE 3 个)和减数分裂后标记(在 6 个活检中检测到鱼精蛋白,在 3 个活检中检测到顶体素)。此外,我们能够诱导从三个活组织检查中分离的精原细胞发育为减数分裂和/或减数分裂后阶段。因此,我们的研究首次表明在没有 SCOS 患者精子的活检中存在减数分裂和/或减数分裂后细胞。